分光光度計樣品室中的光束為1條時叫單光束，2條時叫雙光束。如圖所示，單光束裝置中，出自分光器的單色光直接入射檢測器。在雙光束裝置中出自分光器的單色光被分割為樣品光和參比光后，入射檢測器。采用單光束方式的裝置，配置簡單、廉價。

1、雙光束分光光度計 以兩束光一束通過樣品、另一束通過參考溶液的方式來分析樣品的分光光度計。這種方式可以克服光源不穩定性、某些雜質干擾因素等影響，還可以檢測樣品隨時間的變化等；
2、單光束分光光度計是由一束經過單色器的光，輪流通過參比溶液和樣品溶液，以進行光強度測量。這種分光光度計的特點是：結構簡單 價格便宜 主要適于做定量分析；
缺點是：測量結果受電源的波動影響較大，容易給定量結果帶來較大誤差，此外，這種儀器操作麻煩，不適于做定性分析。

一般測試單光束和雙光束測試的結果應該一樣的，但是測試樣品的濃度范圍雙光束的更廣，精度更高，穩定性更好等。